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全新正版图书 基因工程实验项目化教程韦平和化学工业出版社9787122417626人天图书专营店书籍详细信息
- ISBN:9787122417626
- 作者:暂无作者
- 出版社:暂无出版社
- 出版时间:2021-03
- 页数:244
- 价格:37.90
- 纸张:胶版纸
- 装帧:平装-胶订
- 开本:16开
- 语言:未知
- 丛书:暂无丛书
- TAG:暂无
- 豆瓣评分:暂无豆瓣评分
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内容简介:
《基因工程实验项目化教程》为“十三五”江苏省高等学校重点教材。全书选取L-天冬酰胺酶Ⅱ为目标产品,以大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)的克隆和表达为主线,按照基因工程的操作流程将相关知识和技能分解为前后连贯的9个项目、34项任务,涉及的内容主要包括核酸分离纯化、聚合酶链式反应(PCR)、DNA体外重组、重组子筛选和鉴定、基因诱导表达与产物分析、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳以及基因工程实验安全与防护等。本书突出知识、技能和素质的同步提升,深入浅出,图文并茂,适合项目载体、任务驱动、学生主体的行动导向教学。 本书可供职业本科、应用型本科院校生物科学类、生物工程类、药学类专业使用,也可供高职高专生物技术类、制药技术类等相关专业使用,还可以作为相关企事业单位参考用书。
书籍目录:
项目一基因工程实验及防护 00pan>
【学】 00pan>
【项目说明】 00pan>
【基础知识】 00pan>
(一)基因工程概述 00pan>
(二)基因工程实验及生物操作规范 005
【项目实施】 010
任务1-1基因工程实验常用的有毒化学试剂及其防护 010
任务1-2掌握基因工程实验常见仪器设备的操作规程和注意事项 014
任务1-3基因工程实验生物危害废品的处理 019
【能力拓展】 02pan>
(一)火灾及 02pan>
(二)触电及急救 026
【实践练032
项目二基因工程实验常用溶液及培养基配制 034
【学】 034
【项目说明】 034
【基础知识】 034
(一)化学试剂的规格和生物试剂的分类 034
(二)溶液浓度的表示、调整和互换 036
(三)溶液的配制 038
(四)生物实验室玻璃器皿的洗涤 042
【项目实施】 044
任务2-1移液器的使用与维护 044
任务2-2配制常用溶液和抗生素 048
任务2-3常用细菌培养基及配制 052
【能力拓展】 055
(一)常用酵母培养基 055
(二)试剂盒 057
(三)体外诊断试剂 059
【实践练062
项目三大肠杆菌基因组DNA的制备 063
【学】 063
【项目说明】 063
【基础知识】 063
(一)核酸的理化质 063
(二)核酸的分离提取原理 067
(三)核酸的固相提取方法 07pan>
【项目实施】 073
任务3-1制备大肠杆菌基因组DNA的操作准备 073
任务3-2SDS法制备大肠杆菌基因组DNA 076
任务3-3CTAB法制备大肠杆菌基因组DNA 079
任务3-4煮沸法制备大肠杆菌基因组DNA 082
【能力拓展】 083
(一)动物基因组DNA的提取 083
(二)植物基因组DNA的提取 085
(三)酵母基因组DNA的提取 085
(四RNA和mRNA的提取 086
【实践练088
项目四PCR扩增大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB) 089
【学】 089
【项目说明】 089
【基础知识】 090
(一)目的基因的分离制备 090
(二)聚合酶链式反应 092
(三)PCR引物设计 095
(四)降落PCR 100
(五)PCR技术的应用 10pan>
【项目实施】 10pan>
任务4-1操作准备 10pan>
任务4-2L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)引物设计 106
任务4-3PCR扩增L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB) 110
任务4-4降落PCR优化L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)扩增退火温度 112
【能力拓展】 114
(一)实时荧光定量PCR 114
(二)菌落PCR 122
(三)常用核酸序列数据库 123
【实践练125
项目五质粒pET-28a的制备 126
【学】 126
【项目说明】 126
【基础知识】 126
(一)质粒 127
(二)pET系列质粒 130
(三)质粒DNA的提取方法 132
(四)琼脂糖电泳鉴定质粒DNA 134
(五)质粒DNA浓度和纯度检测 135
【项目实施】 135
任务5-1操作准备 135
任务5-2SDS碱裂解法小量制备质粒pET-28a 137
任务5-3SDS碱裂解法大量制备质粒pET-28a 14pan>
任务5-4少量提取质粒pET-28a的简易方法 142
任务5-5煮沸裂解法快速提取质粒pET-28a 144
【能力拓展】 145
(一)酵母表达载体 145
(二)质粒图谱的绘制 147
(三)质粒资源的获取方式 15pan>
【实践练155
项目六琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA、PCR产物及质粒pET-28a 157
【学】 157
【项目说明】 157
【基础知识】 157
(一)电泳 157
(二)琼脂糖凝胶电泳 158
(三)核酸电泳的指示剂与染色剂 16pan>
(四)核酸电泳的DNA分子量标记 163
【项目实施】 165
任务6-1操作准备 165
任务6-2琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA、质粒pET-28a及PCR产物 166
任务6-3PCR扩增产物的纯化回收 172
【能力拓展】 174
(一)新型核酸荧光染料 174
(二)脉冲场凝胶电泳 177
(三)双相电泳 179
(四)微型凝胶电泳 180
【实践练18pan>
项目七L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)和质粒pET-28a的酶切与连接 182
【学】 182
【项目说明】 182
【基础知识】 182
(一)核酸工具酶及主能 182
(二)限制内切核酸酶 183
(三)DNA连接酶 186
(四)重组DNA分子的构建 188
【项目实施】 188
任务7-1操作准备 188
任务7-2目的基因ansB和质粒pET-28a的双酶切 189
任务7-3目的基因ansB和质粒pET-28a酶切产物的检测、纯化和回收 19pan>
任务7-4目的基因ansB和质粒pET-28a的连接 193
【能力拓展】 195
(一)DNA甲基化酶及其它工具酶 195
(二)Ⅱ型限制内切核酸酶的几种特殊类型 196
(三)目的基因片段与载体分子的连接方法 197
(四)末端转换常用的方法和使用的主要工具酶 198
【实践练199
项目八将重组质粒pET-28a-ansB转化大肠杆菌BL21 0
【学】 0
【项目说明】 0
【基础知识】 pan>
(一)细菌自然转化 pan>
(二)重组 DNA分子的转化 3
(三)受体细胞与感受态 5
【项目实施】 6
任务8-1操作准备 6
任务8-2大肠杆菌BL21感受态细胞的制备 8
任务8-3用热激法将重组质粒pET-28a-ansB导入大肠杆菌BL21 210
任务8-4用电穿孔法将重组质粒pET-28a-ansB导入大肠杆菌BL21 212
【能力拓展】 214
(一)重组DNA转化酵母的方法 214
(二)重组DNA转化动物细胞的方法 215
(三)转基因技术 217
【实践练219
项目九重组子的鉴定及ansB基因表达产物分析 2
【学】 2
【项目说明】 2
【基础知识】 2
(一)重组子的筛选与鉴定 2
(二)目的基因在宿主细胞中的表达 224
(三)基因表达产物的电泳分析及酶活检测 226
【项目实施】 229
任务9-1操作准备 229
任务9-2重组菌中ansB基因的诱导表达和粗提取 23pan>
任务9-3基因表达产物的SDS-PAGE检测 232
任务9-4基因表达产物的酶活检测 235
【能力拓展】 236
(一)蛋白质工程 236
(二)大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ的结构与改造 238
(三)重组菌L-天冬酰胺酶Ⅱ的纯化策略 24pan>
【实践练242
参考文献 244
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书籍介绍
《基因工程实验项目化教程》为“十三五”江苏省高等学校重点教材。全书选取L-天冬酰胺酶Ⅱ为目标产品,以大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)的克隆和表达为主线,按照基因工程的操作流程将相关知识和技能分解为前后连贯的9个项目、34项任务,涉及的内容主要包括核酸分离纯化、聚合酶链式反应(PCR)、DNA体外重组、重组子筛选和鉴定、基因诱导表达与产物分析、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳以及基因工程实验安全与防护等。本书突出知识、技能和素质的同步提升,深入浅出,图文并茂,适合项目载体、任务驱动、学生主体的行动导向教学。 本书可供职业本科、应用型本科院校生物科学类、生物工程类、药学类专业使用,也可供高职高专生物技术类、制药技术类等相关专业使用,还可以作为相关企事业单位参考用书。
书籍真实打分
故事情节:3分
人物塑造:4分
主题深度:5分
文字风格:7分
语言运用:8分
文笔流畅:9分
思想传递:9分
知识深度:6分
知识广度:8分
实用性:6分
章节划分:4分
结构布局:9分
新颖与独特:9分
情感共鸣:5分
引人入胜:7分
现实相关:3分
沉浸感:5分
事实准确性:3分
文化贡献:8分
网站评分
书籍多样性:3分
书籍信息完全性:8分
网站更新速度:6分
使用便利性:3分
书籍清晰度:5分
书籍格式兼容性:9分
是否包含广告:5分
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安全性:3分
稳定性:6分
搜索功能:5分
下载便捷性:9分
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