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全新正版图书 基因工程实验项目化教程韦平和化学工业出版社9787122417626人天图书专营店书籍详细信息

  • ISBN:9787122417626
  • 作者:暂无作者
  • 出版社:暂无出版社
  • 出版时间:2021-03
  • 页数:244
  • 价格:37.90
  • 纸张:胶版纸
  • 装帧:平装-胶订
  • 开本:16开
  • 语言:未知
  • 丛书:暂无丛书
  • TAG:暂无
  • 豆瓣评分:暂无豆瓣评分

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内容简介:

《基因工程实验项目化教程》为“十三五”江苏省高等学校重点教材。全书选取L-天冬酰胺酶Ⅱ为目标产品,以大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)的克隆和表达为主线,按照基因工程的操作流程将相关知识和技能分解为前后连贯的9个项目、34项任务,涉及的内容主要包括核酸分离纯化、聚合酶链式反应(PCR)、DNA体外重组、重组子筛选和鉴定、基因诱导表达与产物分析、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳以及基因工程实验安全与防护等。本书突出知识、技能和素质的同步提升,深入浅出,图文并茂,适合项目载体、任务驱动、学生主体的行动导向教学。 本书可供职业本科、应用型本科院校生物科学类、生物工程类、药学类专业使用,也可供高职高专生物技术类、制药技术类等相关专业使用,还可以作为相关企事业单位参考用书。

书籍目录:

项目一基因工程实验及防护 00pan>

【学】 00pan>

【项目说明】 00pan>

【基础知识】 00pan>

(一)基因工程概述 00pan>

(二)基因工程实验及生物操作规范 005

【项目实施】 010

任务1-1基因工程实验常用的有毒化学试剂及其防护 010

任务1-2掌握基因工程实验常见仪器设备的操作规程和注意事项 014

任务1-3基因工程实验生物危害废品的处理 019

【能力拓展】 02pan>

(一)火灾及 02pan>

(二)触电及急救 026

【实践练032

项目二基因工程实验常用溶液及培养基配制 034

【学】 034

【项目说明】 034

【基础知识】 034

(一)化学试剂的规格和生物试剂的分类 034

(二)溶液浓度的表示、调整和互换 036

(三)溶液的配制 038

(四)生物实验室玻璃器皿的洗涤 042

【项目实施】 044

任务2-1移液器的使用与维护 044

任务2-2配制常用溶液和抗生素 048

任务2-3常用细菌培养基及配制 052

【能力拓展】 055

(一)常用酵母培养基 055

(二)试剂盒 057

(三)体外诊断试剂 059

【实践练062

项目三大肠杆菌基因组DNA的制备 063

【学】 063

【项目说明】 063

【基础知识】 063

(一)核酸的理化质 063

(二)核酸的分离提取原理 067

(三)核酸的固相提取方法 07pan>

【项目实施】 073

任务3-1制备大肠杆菌基因组DNA的操作准备 073

任务3-2SDS法制备大肠杆菌基因组DNA 076

任务3-3CTAB法制备大肠杆菌基因组DNA 079

任务3-4煮沸法制备大肠杆菌基因组DNA 082

【能力拓展】 083

(一)动物基因组DNA的提取 083

(二)植物基因组DNA的提取 085

(三)酵母基因组DNA的提取 085

(四RNA和mRNA的提取 086

【实践练088

项目四PCR扩增大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB) 089

【学】 089

【项目说明】 089

【基础知识】 090

(一)目的基因的分离制备 090

(二)聚合酶链式反应 092

(三)PCR引物设计 095

(四)降落PCR 100

(五)PCR技术的应用 10pan>

【项目实施】 10pan>

任务4-1操作准备 10pan>

任务4-2L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)引物设计 106

任务4-3PCR扩增L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB) 110

任务4-4降落PCR优化L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)扩增退火温度 112

【能力拓展】 114

(一)实时荧光定量PCR 114

(二)菌落PCR 122

(三)常用核酸序列数据库 123

【实践练125

项目五质粒pET-28a的制备 126

【学】 126

【项目说明】 126

【基础知识】 126

(一)质粒 127

(二)pET系列质粒 130

(三)质粒DNA的提取方法 132

(四)琼脂糖电泳鉴定质粒DNA 134

(五)质粒DNA浓度和纯度检测 135

【项目实施】 135

任务5-1操作准备 135

任务5-2SDS碱裂解法小量制备质粒pET-28a 137

任务5-3SDS碱裂解法大量制备质粒pET-28a 14pan>

任务5-4少量提取质粒pET-28a的简易方法 142

任务5-5煮沸裂解法快速提取质粒pET-28a 144

【能力拓展】 145

(一)酵母表达载体 145

(二)质粒图谱的绘制 147

(三)质粒资源的获取方式 15pan>

【实践练155

项目六琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA、PCR产物及质粒pET-28a 157

【学】 157

【项目说明】 157

【基础知识】 157

(一)电泳 157

(二)琼脂糖凝胶电泳 158

(三)核酸电泳的指示剂与染色剂 16pan>

(四)核酸电泳的DNA分子量标记 163

【项目实施】 165

任务6-1操作准备 165

任务6-2琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA、质粒pET-28a及PCR产物 166

任务6-3PCR扩增产物的纯化回收 172

【能力拓展】 174

(一)新型核酸荧光染料 174

(二)脉冲场凝胶电泳 177

(三)双相电泳 179

(四)微型凝胶电泳 180

【实践练18pan>

项目七L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)和质粒pET-28a的酶切与连接 182

【学】 182

【项目说明】 182

【基础知识】 182

(一)核酸工具酶及主能 182

(二)限制内切核酸酶 183

(三)DNA连接酶 186

(四)重组DNA分子的构建 188

【项目实施】 188

任务7-1操作准备 188

任务7-2目的基因ansB和质粒pET-28a的双酶切 189

任务7-3目的基因ansB和质粒pET-28a酶切产物的检测、纯化和回收 19pan>

任务7-4目的基因ansB和质粒pET-28a的连接 193

【能力拓展】 195

(一)DNA甲基化酶及其它工具酶 195

(二)Ⅱ型限制内切核酸酶的几种特殊类型 196

(三)目的基因片段与载体分子的连接方法 197

(四)末端转换常用的方法和使用的主要工具酶 198

【实践练199

项目八将重组质粒pET-28a-ansB转化大肠杆菌BL21 0

【学】 0

【项目说明】 0

【基础知识】 pan>

(一)细菌自然转化 pan>

(二)重组 DNA分子的转化 3

(三)受体细胞与感受态 5

【项目实施】 6

任务8-1操作准备 6

任务8-2大肠杆菌BL21感受态细胞的制备 8

任务8-3用热激法将重组质粒pET-28a-ansB导入大肠杆菌BL21 210

任务8-4用电穿孔法将重组质粒pET-28a-ansB导入大肠杆菌BL21 212

【能力拓展】 214

(一)重组DNA转化酵母的方法 214

(二)重组DNA转化动物细胞的方法 215

(三)转基因技术 217

【实践练219

项目九重组子的鉴定及ansB基因表达产物分析 2

【学】 2

【项目说明】 2

【基础知识】 2

(一)重组子的筛选与鉴定 2

(二)目的基因在宿主细胞中的表达 224

(三)基因表达产物的电泳分析及酶活检测 226

【项目实施】 229

任务9-1操作准备 229

任务9-2重组菌中ansB基因的诱导表达和粗提取 23pan>

任务9-3基因表达产物的SDS-PAGE检测 232

任务9-4基因表达产物的酶活检测 235

【能力拓展】 236

(一)蛋白质工程 236

(二)大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ的结构与改造 238

(三)重组菌L-天冬酰胺酶Ⅱ的纯化策略 24pan>

【实践练242

参考文献 244

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书籍介绍

《基因工程实验项目化教程》为“十三五”江苏省高等学校重点教材。全书选取L-天冬酰胺酶Ⅱ为目标产品,以大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)的克隆和表达为主线,按照基因工程的操作流程将相关知识和技能分解为前后连贯的9个项目、34项任务,涉及的内容主要包括核酸分离纯化、聚合酶链式反应(PCR)、DNA体外重组、重组子筛选和鉴定、基因诱导表达与产物分析、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳以及基因工程实验安全与防护等。本书突出知识、技能和素质的同步提升,深入浅出,图文并茂,适合项目载体、任务驱动、学生主体的行动导向教学。 本书可供职业本科、应用型本科院校生物科学类、生物工程类、药学类专业使用,也可供高职高专生物技术类、制药技术类等相关专业使用,还可以作为相关企事业单位参考用书。

书籍真实打分

故事情节:3分

人物塑造:4分

主题深度:5分

文字风格:7分

语言运用:8分

文笔流畅:9分

思想传递:9分

知识深度:6分

知识广度:8分

实用性:6分

章节划分:4分

结构布局:9分

新颖与独特:9分

情感共鸣:5分

引人入胜:7分

现实相关:3分

沉浸感:5分

事实准确性:3分

文化贡献:8分

网站评分

书籍多样性:3分

书籍信息完全性:8分

网站更新速度:6分

使用便利性:3分

书籍清晰度:5分

书籍格式兼容性:9分

是否包含广告:5分

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安全性:3分

稳定性:6分

搜索功能:5分

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